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Ni-TED是一种将螯合了镍离子的TED配基键结合在琼脂糖微球上的亲和层析分离介质。由于TED对镍离子超强的螯合能力，使亲和Ni-TED能够耐受高浓度的螯合剂EDTA和还原剂DTT，适用于含有EDTA或DTT等成分的组氨酸标记(His-Tag)的基因工程蛋白质以及能够与Ni2+相互作用的生物分子的分离纯化。

• 性能稳定，耐受EDTA、DTT和NaOH，无需预处理即可上样。
  
• 较高动态吸附容量，可对接常用层析设备。
  
• 无需脱Ni，直接进行NaOH清洗，大大缩短了清洗周期。

• 结合缓冲液：20mM PB，0.5M NaCl，pH7.4。
  
• 洗杂缓冲液：20mM PB，0.5M NaCl，1～30mM咪唑，pH7.4。
  
• 洗脱缓冲液：20mM PB，0.5M NaCl，500mM咪唑，pH7.4。

• 配制缓冲液所需要的水和化学试剂必须是高纯度的，并且使用前要过0.45μm的微孔滤膜。不建议样品和结合缓冲液中添加咪唑，洗杂缓冲液中的咪唑最优浓度取决于蛋白样品，通常可以选择10～20mM的咪唑浓度。
  
• 缓冲液中NaCl是为了抑制树脂的离子交换作用。
  
• 一般情况下，洗脱液中的咪唑浓度可洗脱下大多数的目的蛋白，也可适当提高咪唑浓度，增加孵育时间，使洗脱效果更好。
  
• 如果是包涵体纯化，在平衡液、洗杂液、洗脱液中添加8M尿素或6M盐酸胍，效果会更好。

• 样品的准备：将宿主细胞碎片通过离心等方式去除，然后过0.45μm的微孔滤膜，用结合缓冲液进行适当稀释。为了获得最大的载量，不要在蛋白样品溶液中添加咪唑。
  
• 水洗：用5～10倍柱体积纯水以50~150cm/h清洗树脂，去除乙醇。
  
• 平衡：用5～10倍柱体积结合缓冲液以150~600cm/h平衡介质，保证介质中的溶液的组分和pH与样本一致。
  
• 上样：样品经过离心、过滤(0.45μm)后以低流速进行上样，建议流速150cm/h。
  
  • 蛋白的结合能力随着裂解物类型、目标蛋白性质、流速、pH变化而变化，流速越低，结合效果越好。纯化时温度比较低时可以减小流速，防止样品和缓冲液黏度变大导致柱压太高。
• 洗杂：用10～20倍柱体积洗杂液以150cm/h洗杂，清洗非特异吸附的杂蛋白，并收集洗杂液用于后续分析。
  
• 洗脱：用5～10倍柱体积洗脱液以低流速进行洗脱，并收集洗脱液。
  
  • 对于洗脱，除了选用咪唑，还有其他方式，例如降低pH值(2.5~5.0)。本制品每次使用后不需要用镍离子再生，但是使用低pH时需要用镍离子再生。
• 水洗：用5～10倍柱体积纯化水以0.5mL/min清洗树脂介质，去除介质中洗脱液。
  
• 保存：用5～10倍柱体积20%乙醇以0.5mL/min清洗清洗介质，在4～8℃保存。
  
  • 4～8℃保存在20%乙醇中可以防止微生物的生长。
• 再生：用2倍柱体积1mol/l NaOH清洗树脂介质，接着用10～20倍柱体积去离子水冲洗。若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。

• 对于强结合蛋白质或脂类物质，可采用以下流程进行在位清洗：2倍柱体积的1M NaOH，2倍柱体积的4M尿素或3M盐酸胍，2倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇，5～10倍柱体积去离子水，5～10倍柱体积的平衡缓冲液。
  
• 建议树脂每使用5～10次后进行一次清洗，具体清洗频率需根据纯化的初始样品的洁净度进行调整。